Het Rijksmuseum Twente heeft een aanzienlijke en gevarieerde eigen collectie schilderijen en kunstvoorwerpen zoals heiligenbeelden en doopvonten. Deze collectie omvat kunst uit de afgelopen 7 eeuwen, verdeeld over diverse periodes en van verschillende kunststromingen.
Naast het regelmatig aan- en verkopen van kunst, wordt er ook kunst uitgewisseld met nationale en internationale musea. Op deze manier blijft de collectie in beweging en gevarieerd, wat ook blijkt uit de wisselende exposities die het museum door het jaar heen organiseert.